IPTG CAS:367-93-1 Vervaardigersprys
Isopropyl β-D-1-tiogalaktopiranoside (IPTG) is 'n sintetiese analoog van laktose wat algemeen gebruik word in molekulêre biologie navorsing en biotegnologie toepassings.IPTG word hoofsaaklik gebruik om die uitdrukking van gene in bakteriese sisteme te induseer, waar dit dien as 'n molekulêre sneller om die transkripsie van teikengene te inisieer.
Wanneer dit by die groeimedium gevoeg word, word IPTG deur die bakterieë opgeneem en kan dit aan die lac-onderdrukkerproteïen bind, wat verhoed dat dit die aktiwiteit van die lac-operon blokkeer.Die lac-operon is 'n groep gene wat by laktosemetabolisme betrokke is, en wanneer die onderdrukkerproteïen verwyder word, word die gene uitgedruk.
IPTG word dikwels gebruik in samewerking met die lacUV5 mutant promotor, wat 'n konstitutief aktiewe weergawe van die lac promotor is.Deur IPTG-induksie met hierdie mutante promotor te kombineer, kan navorsers hoë vlakke van geenuitdrukking bereik.Dit maak voorsiening vir die produksie van groot hoeveelhede proteïen vir suiwering of ander stroomaf toepassings.
Benewens geenuitdrukking, word IPTG ook gereeld in blou/wit siftingstoetse gebruik.In hierdie tegniek word die lacZ-geen tipies aan 'n geen van belang saamgesmelt, en bakterieë wat hierdie samesmeltingsgeen suksesvol uitdruk sal 'n aktiewe β-galaktosidase-ensiem produseer.Wanneer IPTG saam met 'n chromogene substraat soos X-gal bygevoeg word, word bakterieë wat die samesmeltingsgeen uitdruk blou as gevolg van die aktiwiteit van β-galaktosidase.Dit maak voorsiening vir die identifikasie en seleksie van rekombinante stamme wat die geen van belang suksesvol geïntegreer het.
Induksie van geenuitdrukking: IPTG word algemeen gebruik om die uitdrukking van teikengene in bakteriese sisteme te veroorsaak.Dit boots die natuurlike induseerder laktose na en bind aan die lac-onderdrukkerproteïen, wat verhoed dat dit die lac-operon blokkeer.Dit maak voorsiening vir die transkripsie en uitdrukking van die verlangde gene.
Proteïenuitdrukking en suiwering: IPTG-induksie word dikwels gebruik om groot hoeveelhede rekombinante proteïene vir verskeie doeleindes te produseer, soos biochemiese studies, terapeutiese produksie of strukturele analise.Deur toepaslike uitdrukkingsvektore en IPTG-induksie te gebruik, kan navorsers hoë vlakke van teikenproteïenproduksie in bakteriese gashere bereik.
Blou/wit sifting: IPTG word gereeld gebruik in kombinasie met die lacZ geen en 'n chromogeniese substraat, soos X-gal, vir blou/wit siftingstoetse.Die lacZ-geen is tipies saamgesmelt met die geen van belang, en bakterieë wat hierdie samesmeltingsgeen suksesvol uitdruk sal 'n aktiewe β-galaktosidase-ensiem produseer.Wanneer IPTG en die chromogene substraat bygevoeg word, word rekombinante stamme wat die samesmeltingsgeen uitdruk blou, wat maklike identifikasie en seleksie moontlik maak.
Studie van geenregulering: IPTG-induksie word algemeen in navorsing gebruik om die regulering van gene en operone, veral die lac-operon, te bestudeer.Deur die konsentrasies van IPTG te manipuleer en die uitdrukking van lac-operonkomponente te monitor, kan navorsers die meganismes van geenregulering en die rol van verskeie faktore of mutasies ondersoek.
Geenuitdrukkingstelsels: IPTG is 'n deurslaggewende komponent in verskeie geenuitdrukkingstelsels, soos die T7-promotor-gebaseerde stelsels.In hierdie stelsels word die lac-promotor dikwels gebruik om die uitdrukking van T7 RNA-polimerase aan te dryf, wat op sy beurt teikengene onder die beheer van T7-promotorvolgordes transkribeer.IPTG word gebruik om die uitdrukking van T7 RNA-polimerase te induseer, wat lei tot die aktivering van teikengeenuitdrukking.
| Samestelling | C9H18O5S |
| Toets | 99% |
| Voorkoms | Wit poeier |
| CAS No. | 367-93-1 |
| Verpakking | Klein en grootmaat |
| Raklewe | 2 jaar |
| Berging | Berg in koel en droë area |
| Sertifisering | ISO. |
