ONPG CAS:369-07-3 Vervaardigerprys

Die effek van ONPG as 'n substraat word deur die ensiem β-galaktosidase gekloof, wat lei tot die vrystelling van 'n geel produk, o-nitrofenol. Hierdie kleurverandering kan spektrofotometries gemeet word, wat die kwantifisering van β-galaktosidase-aktiwiteit moontlik maak. Die toepassing van ONPG is hoofsaaklik in die assessering van geenekspressie in molekulêre biologie en mikrobiologie-navorsing. Dit word algemeen gebruik om β-galaktosidase-aktiwiteit te meet as 'n verslaggewer vir geenekspressiestudies, veral in bakterieë soos E. coli. Die lacZ-geen, wat kodeer vir β-galaktosidase, word dikwels gebruik as 'n merker vir geenekspressie-analise, aangesien die uitdrukking daarvan deur spesifieke toestande geïnduseer kan word of deur spesifieke promotors beheer kan word. Die ONPG-toets bied 'n gerieflike en betroubare metode om die vlak van geenekspressie te bepaal deur die aktiwiteit van β-galaktosidase te meet. Hierdie toets word wyd gebruik in verskeie toepassings, soos die bestudering van promotoraktiwiteit, geenregulering en proteïen-proteïen-interaksies. Daarbenewens kan dit gebruik word om ensiemkinetika te bepaal en die effekte van mutasies of behandelings op ensiemaktiwiteit te evalueer.